1.Marker相關(guān)問題

1.1Marker 不直，偏斜或拖尾

原因：

1.膠配制的問題，制作不均勻或有污染或瓊脂糖質(zhì)量不好；

2.電泳緩沖液過于老舊，考慮更換；

3.電壓太高，凝膠受熱導(dǎo)致不均勻；

4.電泳槽的電極歪斜；

1.2Maker 跑不開

原因：

1.膠濃度太大；

2.電泳時(shí)間太短；

2.PCR產(chǎn)物相關(guān)問題

2.1沒條帶

原因：

沒跑出來

2.2條帶微弱

原因：

1.DNA降解

2.上樣量過少

3.沒跑出來，產(chǎn)物濃度過低，需再次PCR

2.3非特異性擴(kuò)增

原因：

1.引物設(shè)計(jì)不合理。需重新設(shè)計(jì)引物，balst檢測(cè)引物特異性；

2.試劑被污染。包括水，酶，引物等。重新更換；

3.退火溫度太高。提高退火溫度，增加退火時(shí)間，減少循環(huán)數(shù)；

4.酶加入過多；

2.4 PCR產(chǎn)物彌散，拖尾或偏斜，Maker正常

原因：

1. 引物保存不當(dāng)，降解。重新配制引物工作液。

2.模板降解或過量。重新檢查模板質(zhì)量，減少模板用量。

3.非特異性擴(kuò)增。提高退火溫度，增加退火時(shí)間，減少循環(huán)數(shù)。

4.酶量過多或酶的質(zhì)量差。

5. 有蛋白和鹽的污染。

2.5 PCR產(chǎn)物和Maker 都彌散或拖尾

原因：

1.膠配制的問題，制作不均勻或有污染或瓊脂糖質(zhì)量不好；

2.電泳緩沖液過于老舊，考慮更換。

3.電壓太高，凝膠受熱導(dǎo)致不均勻。

2.6 PCR產(chǎn)物與目的大小不符合

原因：

1.引物特異性不好。需重新設(shè)計(jì)引物，balst檢測(cè)引物特異性。

2.存在新的異構(gòu)體。

3.是目的基因，但大小有差異（我遇到過）。膠回收過后再次電泳條帶變?yōu)檎４笮　Ｓ龅竭@個(gè)情況可以測(cè)序看看結(jié)果。

2.7 電泳孔亮

原因：有蛋白或者多糖的污染，這些大分子物質(zhì)影響了DNA或RNA的出孔，使其停留在孔中或者出孔很慢。導(dǎo)致孔以及接近孔的位置很亮。

以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。

安培生物致力成為推動(dòng)生命科學(xué)進(jìn)步值得信賴的合作者

深圳/湛江安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術(shù)實(shí)力、先進(jìn)的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)?？偛吭O(shè)在廣東，服務(wù)面向全國。安培生物集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供較好的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號(hào)傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線，在各個(gè)領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供較高的水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品，安培生物致力于為廣大的科研機(jī)構(gòu)、高等院校等客戶提供各種產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。

可以在第一時(shí)間為用戶提供比較先進(jìn)的專業(yè)資訊和完備的產(chǎn)品和物流服務(wù)。 專業(yè)的技術(shù)力量使得我們能夠?yàn)閺V大用戶提供強(qiáng)大的技術(shù)支持，深厚的人脈資源使得我們?cè)谌珖饕鞘袚碛斜姸嗟暮献骰锇?，安培生物非常榮幸能將世界上先進(jìn)的高科技產(chǎn)品推薦給國內(nèi)從事生物學(xué)領(lǐng)域科研的老師和同仁。作為專業(yè)性的產(chǎn)品供應(yīng)商，公司出資存?zhèn)淞舜罅楷F(xiàn)貨，配合優(yōu)秀的銷售隊(duì)伍以及專業(yè)的技術(shù)支持，隨時(shí)為客戶提供服務(wù)。